摘要：抑郁、焦慮等負(fù)性情緒在日常生活事件中表現(xiàn)得越來越常見，負(fù)性情緒應(yīng)激與**的關(guān)系已成為當(dāng)前醫(yī)學(xué)和心理學(xué)的研究熱點(diǎn)，情緒的主觀性和復(fù)雜性使情緒應(yīng)激動(dòng)物模型的制備和評(píng)估存在較大難度，本文對(duì)近幾年常用的情緒應(yīng)激動(dòng)物模型進(jìn)行簡(jiǎn)要綜述，以優(yōu)化實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)、制作有效的情緒應(yīng)激動(dòng)物模型，為今后探討人類情緒障礙**的起因和發(fā)病機(jī)制做鋪墊。

關(guān)鍵詞：情緒應(yīng)激；動(dòng)物造模；行為學(xué)

抑郁、焦慮等負(fù)性情緒在日常生活事件中表現(xiàn)得越來越常見，研究表明，在長(zhǎng)期遭受負(fù)性情緒刺激的人群中，抑郁癥等精神疾患及腦老化的發(fā)病率上升,深入探討負(fù)性情緒應(yīng)激在致病過程中的作用機(jī)制，具有重要的研究意義和實(shí)用價(jià)值。由于倫理學(xué)的限制，動(dòng)物實(shí)驗(yàn)是較為理想的研究**發(fā)生機(jī)制的方法。但情緒的主觀性和復(fù)雜性使情緒動(dòng)物模型的制備和評(píng)估存在較大難度，本文對(duì)近幾年常用的情緒應(yīng)激動(dòng)物模型進(jìn)行簡(jiǎn)要綜述。

1 社會(huì)應(yīng)激法

傳統(tǒng)的情緒應(yīng)激動(dòng)物模型將動(dòng)物置于一系列不可逃避的物理或化學(xué)應(yīng)激環(huán)境中，然而該類造模方法通過建立動(dòng)物之間短暫的**社會(huì)關(guān)系，從而誘發(fā)動(dòng)物的負(fù)性情緒心理反應(yīng)及行為，更多地考慮到動(dòng)物的社會(huì)屬性，是一種更加純粹的心理應(yīng)激造模方法，但模型的復(fù)制成功率較低，需對(duì)兩種動(dòng)物的品系、月齡及周圍環(huán)境等因素嚴(yán)格控制。

1.1 社交失敗模型

社會(huì)失敗模型(Social Defeat)*早是 KazunoriMine 等人在 1981 年設(shè)計(jì)的, 實(shí)驗(yàn)者將一批雄性大鼠單獨(dú)飼養(yǎng)以誘發(fā)其攻擊行為傾向。一旦另一受試動(dòng)物進(jìn)入籠內(nèi), 就會(huì)受到大鼠的猛烈攻擊。但我們采用其描述方法復(fù)制實(shí)驗(yàn)效果并不理想，新近研究表明，不同品系的動(dòng)物在社交失敗應(yīng)激中反應(yīng)有差異。王靜等采用樹鼩建立社會(huì)競(jìng)爭(zhēng)失敗病因?qū)W模型，持續(xù) 21 天。其中爭(zhēng)斗失敗者被稱為服從者，表現(xiàn)出逃跑、恐懼、順從等從屬性特征。這個(gè)過程可導(dǎo)致每天 1 h 的直接社交沖突和 23 h 的間接相互影響(比如通過氣味、視覺等)。與正常對(duì)照相比,失敗者 21 天之后顯示了體重、自主活動(dòng)、躲避行為、尿液皮質(zhì)醇水平等的變化,并且這種改變可持續(xù)至少 2 周以上。董競(jìng)成等將攻擊性 CD-1 小鼠與C57 小鼠放于同一環(huán)境中建立小鼠社交失敗模型并分析該模型的行為學(xué)變化特征。結(jié)果顯示應(yīng)激組 C57 小鼠在角落區(qū)域的停留時(shí)間延長(zhǎng)，而在社交區(qū)域的停留軌跡明顯減少。2005 年德國(guó)哥廷根大學(xué)選用性情兇猛、攻擊性強(qiáng)的 Lister Hooded雄鼠攻擊 Wista 雄鼠，成功制備出與臨床表現(xiàn)吻合的抑郁癥動(dòng)物模型，被擊敗的動(dòng)物糖皮質(zhì)**和 ACTH 水平升高，**功能及對(duì)**的抵抗力下降，且有不同腦區(qū)的多巴胺、GABA、谷氨酸和 5-HT 結(jié)合受體逆轉(zhuǎn)改變，但 Lister Hooded 品系大鼠的獲取很難。

社交失敗模型是一種社會(huì)性應(yīng)激，它模擬人類在正常交往中遇到挫折并孤立無助的情景，通過引起動(dòng)物成員之間的社會(huì)沖突產(chǎn)生應(yīng)激，在大鼠中由一個(gè)侵略雄性所引起的社交失敗是一種自然應(yīng)激因子，該種應(yīng)激能引起分子、生理及行為變化，這種變化有時(shí)會(huì)很持久，包括自發(fā)及探索活動(dòng)減少，侵略行為及性行為減少，服從行為及焦慮增加；同時(shí)相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道顯示，社交失敗應(yīng)激對(duì)獎(jiǎng)賞系統(tǒng)產(chǎn)生影響，從而引起動(dòng)物興趣下降及快感缺失，這恰恰與抑郁癥的核心癥狀相似。

2 間接刺激法

此類造模方法并非直接對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物進(jìn)行負(fù)性軀體刺激如足底電擊、束縛、禁食禁水或冷刺激產(chǎn)生應(yīng)激，而是以另一批動(dòng)物為依托，實(shí)驗(yàn)者對(duì)其施加各種電擊等刺激，同時(shí)將應(yīng)激 D-gal 組動(dòng)物與直接應(yīng)激動(dòng)物置于同一環(huán)境中，以此誘發(fā)動(dòng)物的心理應(yīng)激反應(yīng)。該類方法在一定程度上降低了模型的軀體應(yīng)激成分，是一種較為理想的情緒應(yīng)激動(dòng)物模型，但其所誘發(fā)的情緒成分復(fù)雜，尚不夠明確。

2.1 旁觀電擊法

Katsura 等設(shè)計(jì)的旁觀電擊小鼠方案作為小鼠的心理應(yīng)激模型。被電擊的小鼠（電擊電流為 2mA，周期 5s，間歇 55s）產(chǎn)生驚叫、驚跳，甚至便失禁；實(shí)驗(yàn)應(yīng)激組小鼠不受電擊，而是旁觀電擊小鼠遭受電擊的過程，通過視覺、聽覺等而產(chǎn)生心理應(yīng)激。但在我們的實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，在實(shí)驗(yàn)的后期有些動(dòng)物在電擊鼠驚叫驚跳時(shí)身體轉(zhuǎn)向另一側(cè)，毫無反應(yīng)，這與動(dòng)物在此過程中心理上產(chǎn)生的適應(yīng)性有關(guān)；同時(shí)，有的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物為了逃避足底電擊,會(huì)爬到箱壁和頂部；動(dòng)物的排泄物可能會(huì)導(dǎo)致電流減小或消失等, 我們?cè)囍ㄟ^增加電流的強(qiáng)度和延長(zhǎng)電擊時(shí)間來克服這些問題。

廠家：上海欣軟

2.2 間接電擊法

課題組前期的實(shí)驗(yàn)提出一種新的情緒誘發(fā)方法——間接電擊激怒法，實(shí)驗(yàn)過程中人為地用電極觸碰攻擊鼠胸腹部，攻擊鼠受電擊后被激惹，對(duì)應(yīng)激組大鼠發(fā)起攻擊，雙方互相撕咬、對(duì)峙，產(chǎn)生憤怒心理和行為。該法的優(yōu)點(diǎn)在于刺激點(diǎn)在攻擊鼠前部，攻擊鼠誤以為是其對(duì)面的實(shí)驗(yàn)鼠挑釁，遂攻擊實(shí)驗(yàn)鼠，很容易進(jìn)入對(duì)峙、打斗狀態(tài)，誘發(fā)的憤怒情緒較為理想，很大程度上減少了軀體應(yīng)激成分。

3 直接刺激法

直接刺激法的種類較多，是目前情緒應(yīng)激動(dòng)物模型*常用的方法，此類方法的特點(diǎn)是實(shí)驗(yàn)者將動(dòng)物置于一種不可避免的應(yīng)激環(huán)境，給予一種或多種刺激，如足底電擊、束縛等，模型制作過程相對(duì)簡(jiǎn)單易操作，對(duì)實(shí)驗(yàn)條件的要求較低，更容易實(shí)現(xiàn)；但不可避免地存在軀體應(yīng)激，若合理控制則較為成功。

3.1 足底電擊、束縛等

很多文獻(xiàn)以足底電擊結(jié)合聲音或光照作為應(yīng)激條件，結(jié)果顯示: 應(yīng)激對(duì)照組與心理應(yīng)激組受到的軀體刺激相同, 但后者無法根據(jù)光信號(hào)預(yù)見電刺激, 因此較前者更緊張, 心理應(yīng)激程度更高。國(guó)內(nèi)新近研究采用光電結(jié)合應(yīng)激方法對(duì)糖尿病大鼠進(jìn)行應(yīng)激。結(jié)果顯示糖尿病大鼠血糖明顯升高， 光電結(jié)合應(yīng)激抑制了大鼠的反應(yīng)，并對(duì)糖尿病大鼠的行為、血糖產(chǎn)生了影響。束縛是一種純粹的挫折應(yīng)激，短時(shí)間的束縛應(yīng)激可成功制作動(dòng)物的焦慮模型，我們的實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，隨著束縛應(yīng)激時(shí)程的增長(zhǎng)，動(dòng)物更多地表現(xiàn)出嗜睡、興趣降低等抑郁樣行為。但不同的束縛方式所引起的引起的軀體應(yīng)激差異大。賀立娟等運(yùn)用慢性束縛應(yīng)激結(jié)合孤養(yǎng)法建立肝氣郁結(jié)證大鼠模型，研究發(fā)現(xiàn),給予大鼠慢性束縛 21d 后，應(yīng)激 D-gal 組 ACTH、CORT 水平升高，具有顯著差異，柴胡疏肝散給藥干預(yù)后可降低其水平，與用藥前結(jié)果有顯著性差異，該結(jié)果提示了此模型的中醫(yī)病理機(jī)制與肝失疏泄有關(guān)。此外,噪音刺激、強(qiáng)迫游泳、冷熱刺激等也可引發(fā)不可逃避性應(yīng)激模型。

3.2 慢性不可預(yù)知性心理應(yīng)激

近幾年來國(guó)內(nèi)外研究多采用多重復(fù)合應(yīng)激法誘發(fā)動(dòng)物的情緒反應(yīng)，慢性不可預(yù)見性心理應(yīng)激方法誘導(dǎo)動(dòng)物的抑郁等復(fù)合負(fù)性情緒行為，此種應(yīng)激模型中應(yīng)激因子多樣化且不可預(yù)測(cè)，能避免單一刺激所引起的適應(yīng)性，可應(yīng)用于慢性心理應(yīng)激的神經(jīng)生物學(xué)和行為心理學(xué)研究。它包括一系列不可預(yù)知的低強(qiáng)度應(yīng)激, 如束縛、強(qiáng)迫游泳、禁食禁水、搖晃等,從病因?qū)W的角度模擬了抑郁癥的環(huán)境誘因, 以曠場(chǎng)行為反應(yīng)以及動(dòng)物的糖水消耗量作為觀測(cè)指標(biāo), 經(jīng)過特異性及可信性評(píng)價(jià),被認(rèn)為是經(jīng)典的慢性抑郁模型。徐志偉等研究發(fā)現(xiàn)逍遙散可通過下調(diào)慢性不可預(yù)知性心理應(yīng)激損傷大鼠下丘腦室旁核區(qū) CRH mRNA 表達(dá)而部分恢復(fù)慢性應(yīng)激大鼠 HPA 軸負(fù)反饋功能，此結(jié)果提示此動(dòng)物模型的預(yù)測(cè)效度較優(yōu)。國(guó)外新近研究顯示，慢性不可預(yù)知性心理應(yīng)激上調(diào)多巴胺 D2 受體的表達(dá)，下調(diào)前額皮質(zhì)的蛋白激酶 A,轉(zhuǎn)錄因子 cAMP 反應(yīng)原件結(jié)合蛋白(CREB)，p-CREB ，cAMP 和蛋白激酶 A 水平下降，這與臨床上抑郁患者的發(fā)現(xiàn)一致，這些初步提示多巴胺系統(tǒng)功能失調(diào)在應(yīng)激相關(guān)的抑郁癥等精神障礙**中起到核心作用。Ian Mahar 等將抑郁癥和抗抑郁**作用的血清素和神經(jīng)性假設(shè)聯(lián)系起來，發(fā)現(xiàn)慢性不可預(yù)知性應(yīng)激顯著地減弱了 5-HT 神經(jīng)遞質(zhì)和 5-HT1A 自受體的敏感性，并且通過減少神經(jīng)再生減輕海馬對(duì) HPA 軸的抑制，使應(yīng)激軸過度活躍惡化。

                   型號(hào)：XR-XQ202

4 基于條件反射的造模方法

4.1 懲罰性飲水

懲罰性飲水模型是將動(dòng)物的飲水行為和不確定的電擊結(jié)合起來，動(dòng)物如果想滿足飲水的需要就可能會(huì)受到電擊的創(chuàng)傷，由此造成動(dòng)物在飲水和避免電擊之間的趨避沖突，產(chǎn)生焦慮反應(yīng)。這種造模方法是從動(dòng)物的本能需要出發(fā)，當(dāng)動(dòng)物的本能遭到威脅時(shí)，它們?cè)谛睦砩袭a(chǎn)生趨避反應(yīng)沖突，誘發(fā)焦慮情緒。此種動(dòng)物模型有較好的預(yù)測(cè)效度，是研究抗焦慮**藥理學(xué)機(jī)制的良好模型。我們?cè)趯?shí)際實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，在實(shí)施這種造模方法前，必須禁水足夠時(shí)間，同時(shí)要將大鼠置于電擊箱中適應(yīng) 4-5 小時(shí)，才能達(dá)到理想效果；我們還發(fā)現(xiàn)由于不同性別甚至不同動(dòng)物個(gè)體在飲水需要方面的差異，它們所遭受的電擊程度不一，這樣造成個(gè)體所誘發(fā)的焦慮程度不一。這與 Ana M. Basso的研究結(jié)果一致，他們發(fā)現(xiàn)當(dāng)與雄性大鼠同等體重匹配時(shí)，雌性大鼠受到更少的懲罰反應(yīng)，更少的飲水?dāng)z入量，雌性大鼠比雄性大鼠對(duì)足底電擊有更低的疼痛閾值，不同的抗焦慮**在兩種性別中顯示出的抗焦慮樣作用有較大差異。Carla Pisu 等研究顯示，喹硫平對(duì) C57BL6/N 飲水沖突模型大鼠顯示出一種抗焦慮作用，5HT1A 拮抗劑WAY100635 消除。這些提示 5HT 系統(tǒng)在焦慮情感障礙模型中的重要作用。

         型號(hào)：XR-XY211

4.2 空瓶應(yīng)激

空瓶應(yīng)激法是以不確定性空瓶飲水刺激作為應(yīng)激源，訓(xùn)練動(dòng)物在特定的時(shí)間段飲水，當(dāng)動(dòng)物感受到缺水應(yīng)激之后，只給予動(dòng)物一個(gè)沒有水的空瓶, 動(dòng)物吸吮空瓶而得不到水,從而產(chǎn)生挫折感，進(jìn)而誘發(fā)動(dòng)物的情緒反應(yīng)。大量研究表明應(yīng)激刺激的不可預(yù)測(cè)性是一個(gè)重要的影響因素。林文娟等研究發(fā)現(xiàn)不同時(shí)程的空瓶應(yīng)激激活 HPA 軸和 SNS 軸(腎上腺素、去甲腎上腺素和皮質(zhì)酮水平升高)的程度不同, 這可能與持續(xù)的慢性應(yīng)激后 SNS反應(yīng)出現(xiàn)了一定程度的適應(yīng)性相關(guān)。歐陽俊彥等采用不確定性空瓶應(yīng)激制作焦慮大鼠模型，發(fā)現(xiàn) GABA 與焦慮大鼠額葉皮質(zhì)的 NOS 及 NO 均呈劑量-效應(yīng)關(guān)系，提示 GABA 可能通過調(diào)節(jié)焦慮大鼠額葉皮質(zhì)中的一氧化氮水平發(fā)揮抗焦慮作用。

5 問題與展望

1872 年達(dá)爾文發(fā)表了《人類和動(dòng)物的表情》一書，詳細(xì)描述了多種動(dòng)物以及人類的多種表情，生動(dòng)地闡述了表情的進(jìn)化過程。他從系統(tǒng)發(fā)生的觀點(diǎn)對(duì)動(dòng)物行為進(jìn)行了比較研究，揭示出不同種的動(dòng)物在行為模式上的相似性。也就是說，高等動(dòng)物的行為成分和功能特征，也能在較低等動(dòng)物身上找到?；谶@個(gè)假設(shè)，情緒應(yīng)激動(dòng)物模型嘗試在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物上復(fù)制人類精神障礙**的特征，此模型相關(guān)的生理和行為變化需符合特定情緒狀態(tài)（表面效度）、**的病因?qū)W（結(jié)構(gòu)效度）、以及藥理學(xué)**反應(yīng)（預(yù)測(cè)效度）。但情緒應(yīng)激的發(fā)生是一個(gè)復(fù)雜的過程，應(yīng)激反應(yīng)因應(yīng)激原種類、動(dòng)物種屬、性別、生理狀態(tài)、周齡、應(yīng)激狀態(tài)、應(yīng)激持續(xù)時(shí)間的不同, 這在一定程度上解釋了各種情緒應(yīng)激所導(dǎo)致的結(jié)果不一致性，但存在著一個(gè)基本的趨勢(shì)：交感-腎上腺髓質(zhì)和下丘腦-垂體-腎上腺皮質(zhì)是應(yīng)激反應(yīng)的重要環(huán)節(jié), 而血清兒茶酚胺和糖皮質(zhì)**水平的上升被視為應(yīng)激反應(yīng)的標(biāo)志。應(yīng)激所引起的個(gè)體反應(yīng)是由神經(jīng)-***-**等系統(tǒng)網(wǎng)絡(luò)共同作用的，究竟哪些系統(tǒng)在情緒應(yīng)激發(fā)生過程中發(fā)揮關(guān)鍵作用，在應(yīng)激的哪一進(jìn)程起作用，這些尚有待進(jìn)一步證實(shí)。

另外認(rèn)知在應(yīng)激發(fā)生和發(fā)展過程中起了很重要的中介作用，不同認(rèn)知水平及性格特質(zhì)的個(gè)體產(chǎn)生的應(yīng)激反應(yīng)不同，而且應(yīng)激的病理生理改變涉及多個(gè)腦區(qū)功能的異常，考察動(dòng)物的基線認(rèn)知水平，并將其加入到情緒應(yīng)激動(dòng)物模型的考慮因素中，會(huì)使情緒應(yīng)激動(dòng)物模型更加接近人類情緒障礙**的發(fā)生機(jī)制，例如在在實(shí)驗(yàn)之前，采用水迷宮篩選認(rèn)知水平接近的動(dòng)物參與造模。

因此，發(fā)展有效、客觀的情緒應(yīng)激動(dòng)物模型，優(yōu)化實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)、指標(biāo)選擇，系統(tǒng)**地認(rèn)識(shí)指標(biāo)的變化，將會(huì)對(duì)進(jìn)一步明確情緒應(yīng)激過程的各個(gè)生理反應(yīng)，深入分析情緒的心理學(xué)發(fā)生機(jī)制，以及今后探討人類情緒障礙**的起因和發(fā)病機(jī)制有重要的指導(dǎo)意義。