大鼠情感行為及學(xué)習(xí)記憶能力方面的研究已受到國內(nèi)外學(xué)者的關(guān)注。臨床研究發(fā)現(xiàn)早年反復(fù)熱性驚厥發(fā)作和日后生長發(fā)育遲滯、學(xué)習(xí)困難、情感行為異常以及顳葉癲癇有一定聯(lián)系; 實驗證實熱性驚厥可導(dǎo)致未成熟腦海馬區(qū)神經(jīng)元變性壞死 ,細胞器及突觸病理性超微結(jié)構(gòu)變化。作者采用熱水浴法建立熱性驚厥大鼠模型 ,探討Morris水迷宮、避暗實驗對大鼠情感行為的影響。

摘 　要 : 　【目的】　 探討Morris水迷宮、避暗實驗對大鼠情感行為及學(xué)習(xí)記憶能力的影響。 　【方法】　 36 只雄性 SD ( S praque 2Dawley) 大鼠隨機分為熱性驚厥組 (febrile seizures grou p ,FS ) ,發(fā)熱對照組 (febrile control group ,F G ) 及正常對照組 ( nor2mal control grou p ,N G ) 。觀察各組大鼠在曠場試驗 (open field test ,OF T) 、避暗試驗 (passive avoidance test ,PA T ) 以及在Morris 水迷宮 ( Morris water maze ,MWM) 試驗中情感行為及學(xué)習(xí)記憶能力的改變。 　【結(jié)果】　 FS 組大鼠與 N G、 F G組相比 :在 OF T 中穿格得分分值 ( 37. 48 ± 7. 09) 降低 ,后肢性站立的次數(shù) ( 12. 11 ± 4. 41) 減少 ,排出糞便粒數(shù) ( 10. 62 ±2. 32) 增多 ,差異有非常顯著性 ( P < 0. 01) ;在 PA T 中 ,FS 組大鼠犯錯次數(shù) ( 4. 02 ± 1. 29) 增加 ,且記憶潛伏期[ ( 169. 71± 103. 22) 秒 ]縮短 ,差異有非常顯著性 ( P < 0. 01) ;在 Morris 水迷宮試驗中 ,FS 組大鼠搜尋站臺的逃逸潛伏期明顯延長 ,差異有非常顯著性 ( P < 0. 01) 。 　【結(jié)論】　 多次熱性驚厥發(fā)作可使大鼠的情感行為和學(xué)習(xí)記憶能力受損。

關(guān)鍵詞 :  行為 ; 學(xué)習(xí)記憶 ; Morris水迷宮；曠場實驗；避暗實驗

1 　對象和方法

1. 1 　對象 　 21 日齡雄性 SD ( S praque 2 Dawley) 大鼠 36

只 ( 西安交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院實驗動物中心提供) , 體重為(50 ± 5) g ; 隨機數(shù)字法均分為熱性驚厥組 ( FS) 、發(fā)熱對照組 ( F G ) 、正常對照組 ( N G ) ,每組大鼠數(shù)目均為 12932 中國兒童保健雜志 2004 年 6 月第 12 卷第 3 期 　 CJ CHC J un. 2004 ,Vol 12 ,No . 3只 ; 各組均于標準環(huán)境下飼養(yǎng) ,自由進食飲水。

1. 2 　方法

1. 2. 1 　建立熱性驚厥模型 　 采用熱水浴法建立熱性驚厥大鼠模型 : 將 FS 組大鼠放入一透明玻璃筒中 ( 直徑 10 cm ,高 50 cm) , 該筒下部有多個小孔和外部相通 ; 將筒豎放于恒溫 ( 45. 0 ± 0. 25) ℃水浴箱 ( 100 cm ×70 cm × 50 cm) 中 ,通過向玻璃筒底墊放橡膠墊片以調(diào)節(jié)筒中水的高度 ,以大鼠沿筒壁站立時僅露出頸部以上為準 ; 每只大鼠上、下午均用該方法誘發(fā)驚厥一次 ,連續(xù) 5 d 共 10 次 ; 觀察驚厥的發(fā)生并記錄驚厥發(fā)生的潛伏期 ( 大鼠入水至驚厥開始的時間間隔 ,記錄單位為min) 、級別、持續(xù)時間 ( 大鼠驚厥開始至驚厥結(jié)束的時間間隔 ,記錄單位為秒) 。F G 組大鼠以同樣的方法在熱水中浸浴 2min 而未發(fā)生驚厥。N G 組不進行任何處理。驚厥級別參照 W J iang 等的標準 :0 級為未發(fā)生抽風(fēng) ;1 級為面部抽動 ;2 級為點頭 ;3 級為前肢陣攣抽搐 ;4 級為全身強直 ;5 級為全身強直陣攣。

1. 2. 2 　曠場試驗 (open field test ,OFT) 　 將一 60 cm× 60 cm × 60 cm 的無頂木盒底部等分為 36 個小方格 ,完成 10 次驚厥的大鼠放置于木盒底部的中央 , 記錄 5min 內(nèi)大鼠活動經(jīng)過的格子數(shù)的得分、后肢性站立的次數(shù)以及排出糞便的粒數(shù)。記分標準為 : 大鼠 1/ 2以上身體進入相鄰方格記 1 分 ,后肢性站立記 1 分 ,合計為其總分。研究認為 , 經(jīng)過的格子數(shù)的得分反映動物的興奮性 ; 后肢性站立的次數(shù)代表大鼠對陌生環(huán)境的適應(yīng)能力 ; 排出糞便的粒數(shù)提示大鼠的緊張程度。

1. 2. 3 避暗試驗 (passive avoidance test ,PA T) XR-XB110型避暗測試箱 ( 上海欣軟信息科技有限公司產(chǎn)) 分明、暗兩室 ,其間有小門相通 ; 避暗習(xí)性使大鼠本能地選擇進入暗室 ,進入暗室的大鼠即刻遭受電擊 ( 3 mA ,50 Hz) 而被動地逃回**的明室。 5 min 不進入暗室則被認為完成了學(xué)習(xí) , 記錄遭受 10 次熱性驚厥后大鼠在完成學(xué)習(xí)前錯誤地進入暗室的次數(shù) , 主要反映大鼠近期學(xué)習(xí)的能力 ; 24 h后再次放回明室 ,記錄大鼠由明室進入暗室的時間 ,即為記憶潛伏期 ,主要反映大鼠近期記憶的能力。

1. 2. 4 　 Morris 水迷宮試驗 ( Morris water maze test ,MWM T) 　 Morris 水迷宮由上海欣軟信息科技有限公司提供，由圓形水池 ( 直徑 160 cm ,高 50 cm) 、攝像頭以及操作分析系統(tǒng) ( 微機及軟件) 組成。圓形水面被通過圓心的兩條假想垂線劃分為 4 個象限。試驗前**使大鼠在水池內(nèi)自由游泳 2 min ,以熟悉環(huán)境。試驗時間共 4. 5 d ,在其中一個象限的正中水域內(nèi)放置一個圓形透明站臺 ( 直徑 10 cm , 高 28cm) ,站臺隱于水面下 2 cm 處 ,水溫保持于 24 ℃左右。每天上、下午各進行 4 次試驗 ,每只大鼠隨機從每個象限的中點面壁式入水 1 次 ,大鼠入水后盡力逃避水患 ,當發(fā)現(xiàn)站臺后則棲身其上 , 圖像采集系統(tǒng)及分析系統(tǒng)自動記錄大鼠找到站臺的潛伏期 ( escape latency) 。如果 120 秒仍未找到站臺 , 由操作者將大鼠引上站臺休息 4 秒 ,并將潛伏期記為 120 秒。每只大鼠上、下午 4次成績的均值作為一個時段值 ( section , Ⅰ 2 Ⅸ ) 進行分析。

1. 3 　統(tǒng)計學(xué)處理 　 所有計量資料均以 … x ±s 表示。依資料性質(zhì)進行方差分析 ,檢驗水準為 α= 0. 05 。

2 　結(jié) 　果

2. 1 　熱性驚厥發(fā)生情況 　 FS 組全部誘發(fā)出熱性驚厥 ,共誘發(fā)驚厥 120 次 ,無 1 例死亡。5 、 4 、 3 、 2 、 1 級驚厥次數(shù) ( 及百分比) 分別為 89 ( 74. 0 %) 、 5 ( 4. 6 %) 、 20(16. 5 %) 、 4 ( 3. 5 %) 、 2 ( 1. 4 %) 次 ; 驚厥發(fā)生的潛伏期為( 4. 02 ± 0. 76) min ; 驚厥持續(xù)時間為 ( 1. 01 ± 0. 53)min 。

2. 2 　曠場試驗中情感行為的改變 　 FS 組大鼠穿格得分分值 ( 37. 48 ± 7. 09) *低 ,后肢性站立的次數(shù) ( 12. 11± 4. 41) *少 ,5 min 內(nèi)排出的糞便粒數(shù) ( 10. 62 ± 2.32) *多 ;FS 組與 N G、 F G 組相比在穿格得分 ( q = 4.72 ,4. 18 ; P < 0. 01) 、后肢性站立的次數(shù) ( q = 5. 12 ,4.85 ; P < 0. 01) 以及排出糞便粒數(shù) ( q = 5. 33 ,5. 02 ; P <0. 01) 等方面的差異有非常顯著性。此外 ,在排出糞便粒數(shù)方面 ,N G、 F G 組差異亦有非常顯著性 ( q = 3. 17 ,P < 0. 05) 。Morris水迷宮、避暗實驗對大鼠情感行為的影響